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快速ASF测试是否有优势?

更快的诊断会在对抗非洲猪瘟方面产生重大影响吗?

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Shuhan L, Fang L, Qiubing C, Jing W, Junyi D, Xinlin L, Ying Z, Dongming Z, Zhigao B, Hao Y. 使用基于Cas12a的便携式纸质诊断仪快速检测非洲猪瘟病毒。Cell Discovery. 2020; 6:18. https://doi.org/10.1038/s41421-020-0151-5

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如今,我们已经习惯于听到有关快速诊断测试的话题,这不完全是由于养猪业的快速发展,而是因为我们处于COVID-19大流行中。快速的病原体检测测试在我们的行业中从未被广泛接受,可能仅用于诊断腹泻病例。在消化系统中,尽管诊断的可靠性高,但兽医可能会认为准确的诊断不如实施纠正措施那么紧迫,因为在很多情况下,即使诊断不同,结果也不会有太大的不同。然而,在本文中,快速检测将用于诊断法定传染病,即非洲猪瘟(ASF)。从文章中获得的信息来看,这项快速测试似乎能够检测到甚至是少量的病毒(200个病毒颗粒),这将使其非常敏感和特异,至于所进行的试验,该测试不会对其他病毒产生反应(既不影响猪也不影响人);而且它的成本也很低。但与现有的测试相比,它具有什么优势吗?

事实上,唯一的优势是速度和在现场直接执行的可能性。由于该测试旨在诊断法定传染病(包括在世界动物卫生组织的疾病列表中),其使用将仅限于各国负责动物卫生的官方机构。在这种情况下,速度并不具有显著的优势,因为一旦怀疑感染,第一步将是限制猪场(禁止动物运输),然后立即收集样本以确认或排除怀疑。在这种情况下,可靠性比速度更重要。我们所说的是将诊断过程加快几个小时或最多一天,这并不会实质性地改变这种情况。阳性诊断包括强制扑杀猪场中的所有动物,很难想象这样的措施会基于猪场直接作出的诊断,而没有经过实验室PCROIE认可的一种技术)确认。

ASF不是人畜共患病,因此不会对人类健康构成威胁。如果我们设想一种情况(正如一些人已经预测的那样),这种疾病成为地方性疾病,并且它的爆发不会导致强制捕杀生猪,那么就可以自由地进行诊断测试了。在地方病流行的情况下,我们必须期望病毒的毒性降低,且根据临床症状进行诊断将更加困难,我们甚至可以想象ASF疫苗已经存在并在市场上销售。在这种情况下,诊断的速度、便利性和较低的成本将是一个优点。一项快速的现场诊断试验将使迅速应用旨在减少其传播的所有生物安全措施成为可能,而且可以评估邻近猪场接种疫苗的可能性,以防止更严重的后果。

但让我们回到现实。在目前的情况下,我担心诊断的速度和便利性并不能在抗击非洲猪瘟方面发挥作用,而是会采取其他措施,在某些国家,这些措施现在被视为非常规行为,例如控制非商业性生产 (自消费)以及仍然允许屠宰和销售阳性动物的市场。

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Shuhan L, Fang L, Qiubing C, Jing W, Junyi D, Xinlin L, Ying Z, Dongming Z, Zhigao B, Hao Y. 使用基于Cas12a的便携式纸质诊断仪快速检测非洲猪瘟病毒。Cell Discovery. 2020; 6:18. https://doi.org/10.1038/s41421-020-0151-5

非洲猪瘟病毒(ASFV)是一种dsDNA病毒,可导致严重,高度传染性和致死性的疾病,同时影响家猪和野猪。ASFV给许多国家带来了巨大的经济损失,目前仍然缺乏有效的疫苗和治疗方法。因此,快速、灵敏、可现场使用的ASFV检测对疾病监测和控制具有重要意义。为此,我们开发了一种Cas12a介导的便携式纸片检测方法,以快速、准确地检测ASFV。我们鉴定了一组crRNA,它们识别了基本ASFV基因的高度保守区域。 Cas12a介导的检测分析显示对错配突变的耐受性低,并且与其他常见的猪病原体无交叉反应。我们进一步开发了一种基于纸质的检测方法,可实现无需仪器的ASFV检测。具体来说,我们将金纳米颗粒-抗体偶联物应用于自制试纸条上,并将其与Cas12a介导的ASFV检测结合。这种便携式无仪器诊断纸可检测出猪样品中的ASFV,显示出与传统的依赖于仪器的qPCR方法相当的灵敏度。综上所述,我们开发出了一种高度灵敏,即时且经济的Cas12a介导的ASFV试纸诊断方法,在现场监测ASFV方面具有很大的应用潜力。

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